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启衡星高灵敏探针法qPCR Mix篇之:非洲猪瘟(ASF)检测解决方案

发布日期:2022-05-12 返回列表

启衡星高灵敏探针法qPCR Mix


Starlighter HS Probe qPCR Mix(Universal) 是基于超高性能热启动基因工程改造Taq Pro DNA聚合酶研发的即用型高灵敏探针法qPCR Mix。优化的缓冲液反应体系可有效降低非特异性扩增,大大增加qPCR的扩增效率,适用于超高灵敏的qPCR检测。该产品已通过动物单细胞胚胎性别检测进行验证,可高效扩增低至fg级模板的DNA。该qPCR Mix中的聚合酶使用抗体进行封闭,90℃ 以上30 s可激活酶活性。该产品中的DNA聚合酶催化5’→3'方向合成DNA,有5’ →3’ 外切酶活性,无 3’→5’ 校正外切酶活性。在扩增产物具有3’dA突出末端时,扩增1kb仅需1-l0 s。可兼容不同 qPCR仪器的标准及快速模式。由于该试剂具有超高的检测灵敏性以及抗抑制剂扩增,使其更适用于动物疫病及环境检测等方面的应用。


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| 应用案例一一非洲猪瘟qPCR检测|


非洲猪瘟(African swine fever virus ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine fever virusASFV)感染引起的一种急性、出血性、烈性传染病。其特征是发病过程短,急性感染死亡率高达100%。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,并列入《禁止生物武器公约》核查动物病原体清单,我国将其列为一类动物疫情。


通过对非洲猪瘟病毒基因组的保守区为靶标设计特异性引物及探针,探针标记FAM荧光素;同时以猪基因组的某一段区域为阳性内参设计特异性引物及探针,探针标记VIC荧光素。使用启衡星StarLighter高灵敏探针法 qPCR 预混液(通用型,货号:FS-Q3002),qPCR仪,可对样品中的非洲猪瘟病毒DNA进行快速定性检测。兼容不同仪器机型和升降温速率。



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以非洲猪瘟病毒基因制备符合一级物质标准的质粒标准品,原始浓度为10^ 5拷贝/μL进行梯度稀释,最终浓度为1.2-240000拷贝/反应(理论计算值)。实验结果显示,在10 μL的反应体系中,可实现单拷贝/反应的检测灵敏度。以病毒质粒做标准曲线,扩增效率及R2 值均表现优异。


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与供应商B产品相比,在所有的实测样本中,启衡星表现出更优的检出性能。